金黄色葡萄球菌诱导牛原代乳腺上皮细胞的凋亡

• 作者: 修磊 刘秉春 崔新洁 李奕平 王潇 胡庆亮 陈媛 陶琳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 牛乳腺上皮细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 3212-3219
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.15.016

摘要

[目的]观察金黄色葡萄球菌能否诱导牛原代乳腺上皮细胞发生凋亡.[方法]先以新鲜牛奶为材料分离培养牛乳腺上皮细胞并鉴定,然后用金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察金黄色葡萄球菌诱导牛乳腺上皮细胞凋亡的形态学变化;用流式细胞仪(Annexin V/PI双染法)定量检测金黄色葡萄球菌感染对牛乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR检测细胞凋亡通路中关键蛋白caspase 3和caspase 8 的变化情况.[结果]从乳汁中分离的细胞经原代培养后,细胞呈典型的铺路石状,细胞表层可产生大小不等的乳滴,RT-PCR法扩增出乳腺上皮细胞的骨架蛋白8特异性条带;免疫荧光细胞染色法结果显示分离培养的牛乳腺上皮细胞表达角蛋白8;金黄色葡萄球菌感染牛乳腺上皮细胞3h后,可诱导牛乳腺上皮细胞发生凋亡,表现为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型凋亡特征;Annexin V/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,差异极显著(P＜0.01);与对照组相比,感染组细胞caspase3及caspase 8表达量明显增高.[结论]金黄色葡萄球菌可以诱导牛原代乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征和生化特性,凋亡通路可能涉及caspase 3和caspase 8参与的外源性凋亡途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王潇	内蒙古大学生命科学学院	18	91	6.0	8.0
2	胡庆亮	内蒙古大学生命科学学院	6	26	3.0	5.0
3	崔新洁	内蒙古大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
4	刘秉春	内蒙古大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
5	陶琳	内蒙古大学生命科学学院	2	11	1.0	2.0
6	修磊	内蒙古大学生命科学学院	3	17	2.0	3.0
7	陈媛	内蒙古大学生命科学学院	2	12	1.0	2.0
8	李奕平	内蒙古大学生命科学学院	2	15	2.0	2.0