盐穗木过氧化氢酶基因的克隆与功能分析

• 作者: 张富春 张霞 彭丹
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 盐穗木 过氧化氢酶 原核表达 耐盐性,功能鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1933-1939
• 页数: 7页
• 分类号: Q785
• 字数: 5482字
• 语种: 中文

摘要

利用同源基因克隆法,从新疆荒漠盐碱地多年生灌木盐穗木(Halostach ys caspica)中克隆获得盐穗木过氧化氢酶基因(HcCAT1).序列分析表明,Hc CA T1基因开放阅读框为1 479 bp,编码492个氨基酸,推测编码蛋白质的分子量为56.7 kD,等电点为6.84.基因序列比对发现,HcCA T1与多种植物过氧化氢酶基因具有较高的同源性.半定量RT-PCR结果表明,HcCAT1基因受盐胁迫而上调表达.将构建的重组质粒pET32a-HcCAT1转化大肠杆菌BL21 (DE3),以IPTG诱导重组蛋白His-HcCAT1的表达；SDS-PAGE和Western印迹检测显示,重组蛋白的分子量大小为77.7 kD,其大小与推测的大小一致；在低温诱导下以可溶性形式表达,且表现出一定的过氧化氢酶活性.盐胁迫实验结果显示,在添加400 mmol/L NaC1、400 mmol/L KCl以及300 mmol/L甘露醇的LB培养基中,重组质粒转化菌的生长情况和生长速率明显优于对照,表明HcCAT1可明显提高大肠杆菌的耐盐性.该研究结果将有助于从抗氧化角度认识盐生植物盐穗木的耐盐分子机理.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张富春	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室	286	2034	23.0	31.0
2	张霞	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室	21	101	7.0	8.0
3	彭丹	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室	4	9	1.0	3.0