龙眼GPX基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析

• 作者: 方智振 李焕苓 林玉玲 蔡英卿 赖钟雄 陈义挺 陈登云
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 龙眼 体细胞胚胎发生 GPX 克隆 生物信息学 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 1483-1489
• 页数: 7页
• 分类号: S667.2|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2013.08.014

摘要

采用RT-PCR与RACE相结合的方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆了长947 bp含有完整开放阅读框的龙眼DlGPX cDNA序列(GenBank登录号为EU364813)和长度为1 736 bp的DNA序列(GenBank登录号为EU680970).其编码1个含有168个氨基酸的蛋白质.DlGPX基因中含有5个内含子,均符合真核生物内含子通用的GT-AG法则.生物信息学分析显示:该蛋白为亲水的酸性蛋白质,定位于叶绿体；与其他植物的GPX有较高的同源性.将该基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为23 ku的蛋白.利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究该基因在龙眼体胚发生发育过程中的表达情况,结果显示,从松散型胚性愈伤组织到不完全胚性紧实球形结构阶段,DlGPX mRNA的转录水平逐渐升高,在胚性紧实球形结构阶段降到最低水平,子叶形胚阶段又上升到与不完全胚性紧实球形结构阶段相当的水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赖钟雄	福建农林大学亚热带果树研究所	473	4127	31.0	41.0
2	蔡英卿	福建农林大学亚热带果树研究所	19	249	10.0	15.0
3	陈义挺	福建农林大学亚热带果树研究所	62	358	11.0	15.0
5	林玉玲	福建农林大学亚热带果树研究所	148	560	10.0	16.0
8	方智振	福建农林大学亚热带果树研究所	13	127	6.0	11.0
9	李焕苓	福建农林大学亚热带果树研究所	6	42	4.0	6.0
10	陈登云	福建农林大学亚热带果树研究所	1	5	1.0	1.0