兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因克隆及其同源性比较

• 作者: 冯玉兰 徐红伟 曹忻 杨具田 柏家林 臧荣鑫 蔡勇 达小强 金方圆
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 兰州大尾羊 H-FABP基因 cDNA末端快速扩增 序列分析
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 639-646
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.03.021

摘要

[目的]克隆兰州大尾羊心脏型肪酸结合蛋白(H-FABP)基因全长cDNA序列,为研究绵羊H-FABP生物学作用和生产应用提供理论依据.[方法]根据已知哺乳动物H-FABP基因cDNA序列,设计5 ′和3 ′特异引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列.[结果]扩增获得兰州大尾羊5 ′端425 bp、3 ′端231 bp片段和177 bp中间片段,拼接获得748 bp兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列(GenBank登录号:JQ780322). 兰州大尾羊H-FABP基因ORF长402 bp,编码133个氨基酸.核苷酸序列分析显示兰州大尾羊H-FABP基因序列与大多数哺乳动物相似,但其第66位发生的碱基转换(T← →G)引起所编码的第22位天门冬氨酸(N)不同于其它所有物种的赖氨酸(K).构建的基因进化树分析结果显示兰州大尾羊与山羊亲缘关系最近.预测兰州大尾羊H-FABP蛋白质的空间结构与山羊和牛H-FABP类似,由2个α螺旋和1 0个反向平行的β折叠组成,10个折叠片围成一个桶状结构,疏水性残基位于桶内,用于结合脂肪酸.[结论]克隆了兰州大尾羊H-FABP基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.