家蚕感染质型多角体病毒相关基因Arylphorin的克隆与鉴定

• 作者: 侯成香 吴萍 耿涛 覃光星 邓祥元 郭锡杰 钱荷英 高坤
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 家蚕 质型多角体病毒 Arylphorin 中肠
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 4594-4602
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.21.023

摘要

[目的]克隆家蚕Arylphorin的cDNA全长序列，利用生物信息学对该序列进行分析，检测该基因在家蚕感染质型多角体病毒（Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus, BmCPV）后的表达量变化模式，为进一步研究其生物学功能奠定基础。[方法]以家蚕中肠总RNA为模板反转录合成cDNA，利用cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆家蚕Arylphorin的全长cDNA；通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析其组织表达模式和在家蚕感染BmCPV后的表达差异。[结果]克隆得到了家蚕Arylphorin的全长cDNA（命名为BmAryl），在GenBank登录号为JN581664。该基因的cDNA全长为2260 bp，包含1个26 bp 5′非翻译区和1个143 bp的3′非翻译区，3′非翻译区包含有终止密码子、多聚腺嘌呤信号AATAAA和poly(A)尾。其最大开放阅读框（ORF）为2091 bp，编码的蛋白由696个氨基酸组成，预测蛋白分子量为82.8 kD，等电点为6.07。多序列比对和系统进化分析发现，家蚕BmAryl蛋白与家蚕的性别专一贮藏蛋白2相似性最高，为66%。BmAryl主要在家蚕的脂肪体和血淋巴中表达，精巢和卵巢中的表达量无明显差别；而在家蚕感染BmCPV后该基因在中肠的表达量明显下调。[结论]成功克隆获得BmAryl的全长cDNA，其编码的蛋白质属于芳香蛋白家族, BmAryl主要在家蚕的脂肪体和血淋巴中表达，不存在性别专一性，且家蚕感染BmCPV后BmAryl在中肠的表达明显下调。