FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的影响

• 作者: 孙思 孙燕 张会琼 张姣姣 张家骅 王怡 王鲜忠
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 促卵泡素 睾丸支持细胞 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白E1
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 1237-1246
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.06.018

摘要

[目的]确定FSH是否能调节支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达及可能的机制.[方法]以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的相对表达量.[结果]不同浓度的FSH(0-100 ng·mL-1)均可促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P＜0.05),在FSH浓度为50 ng·mL-1时两种基因的表达量最大(P＜0.05)；FSH(50 ng·mL-1)也以时间依赖的方式促进了cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P＜0.05),在作用30 min时其表达量达到高峰(P＜0.05).不同浓度的Foskolin (0-20 μmol·L-1)均可以促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P＜0.05),但均低于FSH单独作用时两种基因的表达量；Rp-cAMP(0-40 μmol·L-1)、H-89(0-30 μmol·L-1)和Verapamil(0-100μg·mL-1)以剂量依赖的方式抑制了FSH诱导的cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P＜0.05),而且Rp-cAMP和Verapami1联合作用对FSH的抑制效果高于单独的抑制效果(P＜0.05),但低于两者之和.此外,不同浓度的U0126(0-10μmol·L-1)降低了FSH诱导的cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P＜0.05),而Rp-cAMP、H-89、Verapamil和U0126单独作用时,cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达与对照相比没有显著差异(P＞0.05).[结论]FSH以剂量依赖和时间依赖的方式诱导了cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达；cAMP-PKA、Ca2+和ERK1/2参与了FSH对cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的调节.