5种前处理方法对痰中结核分枝杆菌DNA提取的影响

• 作者: 张兵 张如胜 文岚 欧新华 王孝君 田斌 郭彦昌
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 DNA提取 痰 前处理方法
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1056-1059
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 2684字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2013.09.010

摘要

目的 比较5种痰标本前处理方法,选择适用于基层结核病实验室痰中结核分枝杆菌DNA提取的痰标本前处理方法. 方法 分别采用DDT、NaOH、NALC-NaOH、Trypsin、Chymotrypsin等5种方法对所收集标本进行前处理,比较提取DNA模板的浓度、纯度和核酸扩增结果. 结果 经过5种前处理方法处理后,所提取DNA浓度(ng/μl)的最小值依次是27.30、4.10、9.30、18.60和14.80,最大值依次是84.10、40.20、26.10、111.00和159.00,均值依次是(52.84±19.17)、(16.69±12.72)、(14.38±4.57)、(48.65±25.75)和(53.79±46.27)；以OD260/OD280的比值衡量DNA纯度,其最小值依次是1.75、1.60、1.64、1.60和1.62,最大值依次是1.86、1.85、1.79、1.88和1.84,均值依次是(1.80±0.29)、(1.66±0.88)、(1.74±0.40)、(1.76±0.86)、(1.73±0.74)；16份已知阳性标本采用DDT、NALC-NaOH两种方法处理后扩增结果全部阳性,而采用NaOH、Trypsin、Chyrnotrypsin处理后分别出现了3、8和5份标本阴性. 结论 在基层结核病实验室,对拟进行结核分枝杆菌DNA提取的痰标本应首选二硫代苏糖醇进行前处理,其次选择N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田斌		14	48	4.0	6.0
2	张如胜		11	52	5.0	7.0
3	欧新华		14	58	5.0	7.0
4	郭彦昌		3	11	2.0	3.0
5	张兵		6	25	3.0	5.0
6	文岚		10	37	3.0	5.0
7	王孝君		3	9	2.0	3.0