人脐静脉内皮细胞培养方法的改进

• 作者: 富显果 林宇涵 林敏华 许双临 陈子春
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐静脉内皮细胞 鉴定 细胞培养
• 年，卷（期）: 2013,（24）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 4529-4533
• 分类号: R329-33
• 语种: 中文

摘要

目的 建立高效、可靠、经济的人脐静脉内皮细胞原代培养方法,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段.方法 取健康剖腹产新生婴儿脐带,立即用0.1％Ⅰ型胶原酶室温消化,得血管内皮细胞,置于5％CO2、37℃培养箱进行原代培养,培养基采用M199培养基,含有10％胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、50 μg,/ml肝素钠、10 u/mlbFGF(贝复济,牛碱性成纤维细胞生长因子,basic fibro blast growth factor)、100 u/ml青霉素、50 u/ml庆大霉素.在倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定.结果 采用0.1％Ⅰ型胶原酶灌注法及改良培养基获得了相当数量的人脐静脉内皮细胞.光镜下观察见大量3～4个成团的内皮细胞.细胞接种后4h开始贴壁生长,5 d左右可融合成片,原代细胞呈小三角形、圆形或梭形,细胞分布不均匀,成簇生长,互不重叠;传代细胞多为扁平多角形铺路石状镶嵌排列,3d左右可融合成片.免疫组化可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应.结论 Ⅰ型胶原酶灌注法是获得脐静脉内皮细胞的一种可取方法,成功率高,可靠性大.改良培养基能很好地促进内皮细胞体外培养及传代扩增,可成功构建体外研究血管内皮细胞的模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	富显果		5	34	3.0	5.0
2	许双临		2	6	1.0	2.0
3	陈子春		5	12	2.0	3.0
4	林敏华		4	10	2.0	3.0
5	林宇涵		1	6	1.0	1.0