链球菌性乳房炎LAMP可视化检测方法的建立

• 作者: 何宝祥 左宗辉 杜向宏 杜玉兰 杨蓉 贺婷 赵熠珩 阮氏青海 陈亚明
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 链球菌 环介导等温扩增 可视化检测 乳房炎
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 85-89
• 页数: 5页
• 分类号: S858.23
• 字数: 4244字
• 语种: 中文

摘要

目的 应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,建立一种简便、快速检测链球菌性乳房炎致病菌的方法.方法 本研究根据链球菌属细菌的特异性基因(tuf),设计一套LAMP引物,优化反应条件,进行特异性和敏感性实验.结果 通过反应条件优化,该方法在水浴锅中1h内即可完成全部反应,反应结果肉眼即可判定.对链球菌检测的敏感性最高达到52 fg/μL,是普通PCR方法的10倍,且与其它常见乳房炎致病菌无交叉反应.结论 本研究成功建立了链球菌性乳房炎LAMP可视化检测方法,该法特异、快速、灵敏,操作及结果判定简便,设备要求低,适合基层兽医临床应用.