雷公根叶斑病菌SJTU59纤维素酶液的性质研究及纤维素酶基因保守区域的分析

• 作者: 余传金 吴琼 孙佳楠 张泰龙 李雅乾 王猛 陈捷 高士刚
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 雷公根叶斑病菌SJTU59 纤维素酶 保守区域
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 61-67
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20140309

摘要

将雷公根叶斑病菌SJTU59(Leptosphaerulina chartarum SJTU59)于玉米秸秆粉为唯一碳源的培养液中诱导培养,通过DNS(3,5-二硝基水杨酸)法检测,首次发现其可以产生纤维素酶.该纤维素酶液最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为4.8,对低温,酸碱及部分金属离子具有一定的耐受能力.在50℃,pH4.8条件下,其最大酶活力为6.383±0.196 U/ml.利用纤维素酶基因简并引物,通过PCR技术扩增得到了2个新的纤维素酶基因的保守区域,即glu-ll(1 512 bp)和glu-l2 (429 bp).通过氨基酸序列比对及系统进化分析发现,glu-l1编码的氨基酸序列GLU-L1与Thermoascus aurantiacus var.levisporus来源的β-1,4-葡聚糖酶(ABX79553)有62％的同源性,属于第3水解家族；glu-l2编码的氨基酸序列GLU-L2与Aspergillus fumigatus Af293来源的内切-β-1,3(4)-葡聚糖酶(XP_755769)有49％的同源性,属于第16水解家族.