内质网应激相关蛋白1对衣霉素诱导HepG2细胞内质网应激的影响

• 作者: 殷峻 毛月芹 王倩倩 肖元元 韩峻峰 魏丽 魏美林 黄金伟
• 来源期刊: 中华诊断学电子杂志
• 关键词: 内质网应激 内质网应激相关蛋白1 葡萄糖调节蛋白78 C/EBP同源蛋白 钙联蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 字数: 4302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-655X.2014.01.006

摘要

目的：研究过表达内质网应激相关蛋白1（SERP1）对衣霉素诱导肝癌HepG2细胞内质网应激的影响。方法以衣霉素诱导HepG2细胞发生内质网应激，将细胞分为以下5组：正常对照组、衣霉素组、衣霉素＋0．25μg SERP1转染组、衣霉素＋0．5μg SERP1转染组和衣霉素＋1．0μg SERP1转染组，每组实验重复3次；采用MTT法检测不同浓度与作用时间的衣霉素对HepG2细胞存活率的影响，以吸光度（A ）值表示。Western blot法检测各组细胞内内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白（GRP78）、C／EBP同源蛋白（CHOP）以及钙联蛋白的表达水平。采用SPSS 15．0统计软件进行统计学分析，比较蛋白表达水平。结果与对照组相比，衣霉素处理组HepG2细胞中内质网应激标志性蛋白GRP78、CHOP及 Calnexin 蛋白表达量显著升高，分别为对照处理组的3．8倍（t ＝11．5， P ＜0．05）、1．3倍（t ＝3．498，P ＜0．05）和1．4倍（t ＝4．1，P ＜0．05），差异均有统计学意义；随着SERP1过表达量的逐渐升高，变化呈现剂量依赖性。随着SERP1转染剂量的增加，各组GRP78蛋白的表达较单独衣霉素处理组分别下降了12％[（1．83±0．29）A值，（1．61±0．13）A值，t ＝2．36， P ＞0．05]、24％和30％[（1．83±0．29）A值，（1．40±0．11）A值，（1．27±0．21）A值；F ＝50．56， P ＜0．05]，CHOP蛋白的表达水平分别下降了23％，29％和34％[（1．0±0．15）A值，（0．79±0．07）A值，（0．72±0．55）A值，（0．67±0．14）A值；F ＝9．532，P ＜0．05]，Calnexin蛋白的表达水平分别下降了5％[（1．20±0．18）A值，（1．15±0．13）A值；P ＞0．05]、24％和28％[（1．20±0．18） A值，（0．92±0．07）A值，（0．87±0．18）A值；F＝8．116，P＜0．05]。结论外源性过表达SERP1蛋白通过下调内质网应激蛋白的表达，降低HepG2细胞内质网应激水平，缓解内质网应激介导的细胞损伤。