冻存对细胞因子诱导的杀伤细胞免疫表型及细胞内因子表达的影响

• 作者: 岳冬丽 张斌 张毅 张震 段秀芳 王丽萍 王菲
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子诱导的杀伤细胞 细胞内因子 冻存 免疫表型
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 2509字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2014.01.004

摘要

目的：探讨冻存对外周血来源的细胞因子诱导的杀伤细胞（ CIK）免疫表型及细胞内因子表达的影响。方法：采集10例癌症患者的外周血，采用Ficoll两步法分离外周血单个核细胞，用细胞因子诱导培养得CIK。收集冻存3个月后复苏4、24、72 h的CIK，采用流式细胞术及胞内染色法检测细胞穿孔素、颗粒酶B及干扰素-γ的表达水平，采用AnnexinV/PI双染法检测细胞活性。以未冻存的新鲜CIK作对照。结果：冻存前及复苏4 h后CIK颗粒酶B及干扰素-γ表达水平差异无统计学意义（t＝1．029、0．237，P＞0．05）。冻存前及复苏4、24、72 h后CIK穿孔素表达水平分别为（35．97±7．12）％、（10．00±6．04）％、（17．60±3．92）％和（35．20±6．23）％，差异有统计学意义（F＝47．480，P＜0．001），冻存后CIK穿孔素表达水平显著降低，随着复苏时间的延长，穿孔素表达水平逐渐恢复正常。复苏4、24、72 h后CIK活细胞比例逐渐增多（P＜0．05），复苏72 h后活细胞比例接近100％，细胞活性恢复正常。结论：冻存可能使CIK细胞亚型发生改变。