人 microRNA -194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响

• 作者: 卞娜 周勇 孙聪 杨彤涛 杨静 王鑫 肖春 蔡成魁 赵廷宝 韩康 颜世举 马保安
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: microRNA-194 慢病毒 骨肉瘤 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著 -- 基础研究
• 页码范围: 985-989
• 页数: 5页
• 分类号: R73-36+2|R738.1
• 字数: 4753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2014.05.03

摘要

目的：通过构建携带针对 microRNA -194的 shRNA 载体及过表达载体，包装慢病毒，感染人骨肉瘤细胞系 SOSP -9607，改变细胞内 microRNA -194基因的表达水平，研究 microRNA -194对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响，为探索 microRNA -194作为骨肉瘤生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法：构建沉默及过表达 microRNA -194的慢病毒载体；获得稳定感染的细胞株，改变细胞增殖相关生物学特性。结果：PCR 及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确，过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108 TU/ ml 及4×108 TU/ ml；microRNA -194沉默的人骨肉瘤细胞系 SOSP -9607细胞增殖速度相较于其对照组明显上升；过表达 microRNA -194的 SOSP -9607细胞增殖速度显著下降（P ﹤0.01）。MicroRNA -194沉默的人骨肉瘤细胞系 SOSP -9607细胞凋亡率相较于其对照组明显下降，过表达 microRNA -194的 SOSP -9607细胞凋亡率显著上升（P ﹤0.01）。与对照组比较，过表达 microRNA -194的 SOSP -9607细胞周期 G0/G1细胞比例显著增加，G2/ M 期细胞比例显著减少，S 期细胞比例显著减少（P ﹤0.01）。结论：成功构建了microRNA -194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体；miR -194的表达水平对 SOSP 一9607细胞的增殖和凋亡造成显著影响。MicroRNA -194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点，但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。