转录因子CTCF对人肝癌干细胞及细胞增殖的影响

• 作者: 俞小琴 刘俊 刘秋英 李冉 沈文燕 覃扬 谢晓砚 魏玲
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: CTCF 人肝癌干细胞 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 196-201
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨CCCTC结合因子(CTCF)蛋白对人肝癌细胞(HepG2)的肿瘤干细胞的影响以及对HepG2和CNE1(鼻咽癌细胞系)细胞生存能力的影响.方法 构建pEGFP-N1/CTCF、CTCF shRNA和GFP-shRNA质粒,转染至HepG2和CNE1细胞后,以RT-PCR及Western blot检测CTCF mRNA和蛋白的表达.采用流式细胞术检测转染CTCF-shRNA质粒后48 h的HepG2细胞中携带表面抗原CD90肿瘤干细胞的比例,以转染GFP-shRNA的HepG2细胞和野生型HepG2细胞为对照.采用MTT方法分别检测转染CTCF过表达重组质粒及CTCF-shRNA质粒后24、48、72 h HepG2和CNE1细胞的生存能力.结果 pEGFP-N1/CTCF转染后增加HepG2和CNE1细胞中CTCF mRNA和蛋白的表达(与pEGFP-N1相比,P＜0.05),CTCF-shRNA转染则降低表达(与GFP-shRNA相比,P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示,CD90+细胞的检出率在转染CTCF-shRNA质粒细胞[(1.733 0±0.417 7)％]高于野生型HepG2细胞[(0.575 0±0.062 9)％]及转染对照GFP-shRNA质粒细胞[(0.350 0±0.086 6)％] (P＜0.05);MTT实验结果显示CTCF的表达改变对HepG2和CNE1细胞的生存能力的影响不明显(P＞0.05).结论 CTCF可抑制人肝癌干细胞生成,对HepG2和CNE1细胞生长无明显影响.