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镉对肝细胞中PPP2 R1 A启动子区甲基化及其转录水平的影响
镉对肝细胞中PPP2 R1 A启动子区甲基化及其转录水平的影响
作者:
何承勇
夏斌
廖昆
张玉静
林忠宁
林育纯
殷花
陈慧峰
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
镉
L02细胞
HepG2细胞
PPP2R1A
金属硫蛋白1B
DNA甲基转移酶3A
启动子区甲基化
摘要:
目的:分析镉染毒处理肝细胞中蛋白磷酸酶2A( PP2A)-Aα支架亚基基因PPP2R1A启动子区甲基化状态及其转录水平的改变。方法采用永生化人正常肝L02细胞及肝细胞癌HepG2细胞为研究对象,对其进行以下分组和处理:①低、中和高剂量氯化镉( CdCl2)处理组,分别予浓度为20.0、40.0和60.0 μmol/L CdCl2处理24 h;②低、中和高剂量5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理组,分别予浓度为2.5、5.0和10.0 μmol/L 5-Aza-dC处理48 h;③5-Aza-dC组予浓度为5.0 μmol/L的5-Aza-dC处理48 h,CdCl2组予浓度为40.0 μmol/L 的 CdCl2处理24 h,(5-Aza-dC+CdCl2)组予浓度为5.0 μmol/L的5-Aza-dC预处理48 h后再予浓度为40.0 μmol/L CdCl2处理24 h;④ CdCl2处理组予浓度为40.0 μmol/L CdCl2处理24 h。上述4种分组均设对照组,予等体积生理氯化钠溶液或二甲基亚砜处理。经①~③处理后的细胞采用实时荧光定量聚合酶链反应( PCR)检测PPP2R1A、金属硫蛋白1B(MT1B)和DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)的mRNA转录水平(以对照组水平为1.00)。经④处理后的细胞采用亚硫酸氢盐修饰后PCR扩增PPP2R1A启动子区克隆测序检测CpG岛的甲基化情况。结果 L02细胞和HepG2细胞中,不同剂量CdCl2处理组PPP2R1A mRNA转录水平随镉处理剂量增高呈剂量依赖性下降( P<0.05);不同剂量5-Aza-dC处理组PPP2R1A mRNA转录水平随5-Aza-dC处理剂量增加呈剂量依赖性升高(P<0.05)。2种细胞中,分别与对照组和5-Aza-dC处理组比较,CdCl2处理组和(5-Aza-dC+CdCl2)处理组PPP2R1A mRNA转录水平均下降(P<0.05),MT1B和DNMT3A的mRNA转录水平均升高(P<0.05);与CdCl2处理组比较,(5-Aza-dC+CdCl2)处理组PPP2R1A mRNA转录水平均升高(P<0.05),MT1B和DNMT3A的mRNA转录水平均下降(P<0.05)。甲基化测序结果显示,L02细胞 CdCl2处理组 PPP2R1A 启动子区甲基化率高于对照组(6.35% vs 2.31%,P <0.01), HepG2细胞CdCl2处理组PPP2R1A启动子区甲基化率与对照组比较,差异无统计学意义(5.19% vs 3.85%,P>0.05)。结论外源化学物CdCl2可诱导肝细胞中PPP2R1A转录水平降低,可能与镉能够引起目的基因启动子区甲基化状态改变有关,提示PP2A亚基基因的表观遗传学调控可影响镉诱导的肝细胞功能。
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镉对肝细胞中PPP2 R1 A启动子区甲基化及其转录水平的影响
来源期刊
中国职业医学
学科
医学
关键词
镉
L02细胞
HepG2细胞
PPP2R1A
金属硫蛋白1B
DNA甲基转移酶3A
启动子区甲基化
年,卷(期)
2014,(5)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
496-501
页数
6页
分类号
R114|R135|R735.7
字数
语种
中文
DOI
10.11763/j.issn.2095-2619.2014.05.003
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HepG2细胞
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启动子区甲基化
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研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中国职业医学
主办单位:
中华预防医学会
华南区域劳动卫生职业病防治中心
出版周期:
双月刊
ISSN:
2095-2619
CN:
44-1484/R
开本:
大16开
出版地:
广州市新港西路海康街68号
邮发代号:
46-103
创刊时间:
1974
语种:
chi
出版文献量(篇)
4671
总下载数(次)
2
总被引数(次)
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