化学合成小干扰RNA对大鼠脑内AQP4蛋白沉默效果验证与筛选

• 作者: 刘恩智 单提坤 宋振全 张兴 张海松 柳云恩 赵旭 赵航
• 来源期刊: 创伤与急危重病医学
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 AQP4蛋白 化学合成 沉默效果
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 专题笔谈
• 页码范围: 73-76
• 页数: 4页
• 分类号: R393
• 字数: 2431字
• 语种: 中文

摘要

目的：针对大鼠脑内AQP4蛋白使用化学合成法制备数条小干扰RNA链（siRNA），对其中两条链进行沉默效果验证，并筛选出效果显著的小干扰RNA链。方法根据大鼠的AQP4mRNA序列选择2个不同的靶点，采用化学合成的方法分别合成2条siRNA，并同时合成阴性对照siRNA。雄性成年Wistar大鼠18只，随机分为注射阴性对照液组、注射725链组和注射1006链组，并分别经侧脑室注射相应药物。6 h后将其全部处死，利用免疫组织化学法和原位杂交法分别检测脑内AQP4蛋白和mRNA的表达水平。结果给药6 h后，注射725链siRNA组大鼠脑内AQP4在蛋白质和基因两个水平均显著低于注射阴性对照液组和注射1006链组（P＜0．05）。结论脑室注射725链siRNA 可以在6 h 内有效沉默大鼠脑内AQP4的表达。