烟草 RNA提取方法的优化及冰盒储存时间的探讨

• 作者: 刘仁祥 徐如宏 徐航 段兴友 王国琴 聂琼 蔡琳 袁富 陈绍凯
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 RNA提取 优化试剂盒法 冰盒储存 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 495-500
• 页数: 6页
• 分类号: S570
• 字数: 5226字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2014080

摘要

烟草作为一个模式植物在分子生物学研究中发挥着重要的作用，其总RNA的提取是后续分子生物学研究的前提和关键之一。针对过柱型的RNA提取试剂盒在有效的清除烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的同时，影响了RNA产量和浓度，以及远距离携带液氮取材困难的问题，设置不同提取方法和冰盒不同储运时间处理，对天根RNA simple总RNA提取试剂盒进行了优化，并对冰盒贮存烟叶时间与RNA提取质量的关系进行了探讨。结果表明：优化试剂盒法获得了高浓度高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测，利用该方法提取的烟草总RNA，条带清晰、无拖尾现象，28S与18S 的比例约为2∶1。紫外吸收值的测定表明，所提取的烟草总RNA的A 260/A 280的值在1．8～1．9，浓度显著高于原方法；而冰盒能在5 h内保证所取样品RNA 的完整性，适宜于短途运输储存。