人线粒体超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及其在HUVEC中的表达

• 作者: 仲苓芝 李文雪 李新娜 李玉林 李秀英 李荣贵
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 线粒体超氧化物歧化酶 pcDNA3.0 人脐静脉内皮细胞
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3038字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7694/jldxyxb20140103

摘要

目的:构建人线粒体超氧化物歧化酶2 (SOD2)的真核细胞表达载体,探讨其在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达效果.方法:以HUVEC mRNA为原始模板,应用RT-PCR技术,扩增编码线粒体SOD2全长的cDNA片段.利用分子生物学技术,将扩增的cDNA片段与真核细胞表达载体pcDNA3.0的多酶切位点相连接,构成重组质粒并转染到HUVEC,将细胞分为HUVEC母细胞组、转染pcDNA3.0空载组和转染pcDNA3.0-SOD2组.应用RT-PCR方法检测SOD2在HUVEC中的表达情况.结果:将表达SOD2全长cDNA片段定向克隆至质粒pcDNA3.0,测序结果表明成功构建人线粒体SOD2的真核细胞表达载体pcDNA3.0-SOD2.该载体稳定转染HUVEC后,在细胞内获得了稳定表达.与母细胞组和空载组比较,转染pcDNA3.0-SOD2组SOD2 mRNA表达水平明显增加.结论:成功构建SOD2的真核细胞表达载体pcDNA3.0-SOD2,并在人HUVEC中成功表达.本研究为SOD2对细胞保护作用研究提供了实验模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉林	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	175	846	13.0	18.0
2	李荣贵	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	13	25	3.0	3.0
3	李秀英	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	26	101	5.0	9.0
4	仲苓芝	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	5	7	2.0	2.0
5	李文雪	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	3	2	1.0	1.0
6	李新娜	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	6	5	1.0	1.0