软骨发育不全植入前遗传学诊断的方法学研究

• 作者: 李荣 毕博文 沈晓婷 蒋玮莹 郭奕斌 郭源平
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 关键词: 软骨发育不全(ACH) FGFR3基因 植人前遗传学诊断(PGD) 全基因组扩增 (WGA) 突变特异性扩增系统(ARMS)
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 372-377
• 页数: 6页
• 字数: 4712字
• 语种: 中文

摘要

目的针对软骨发育不全（ACH)高危家系的FGFR3基因的突变类型（C.1138G > A， P.G380R)，建立多种快速特异、行之有效的植人前遗传学诊断(PGD)方法，为实施该ACH家系的PGD 创造必要的前提条件。方法在确诊该ACH患者特定突变类型的基础上，首先用外周血建立各种 PGD方法，包括：A.直接测序法；B. ARMS法；C.酶切鉴定法；D. ARMS/RE法。然后对单个卵裂球的全基因组扩增(WGA)产物进行相应方法学的研究。最后，对各种方法进行优化优选。结果A.直接测序法：正常对照c.1138为G纯合子，而患者为G/A杂合峰；B. ARMS法：正常对照扩增阴性，而患者有445 bp的特异扩增条带。C.酶切鉴定法：正常对照酶切后仍为513 bp，而患者酶切后产生205 bp、308 bp、513 bp三条带；D. ARMS/RE法'正常对照扩增阴性，无法做酶切鉴定。而患者有445 bp扩增产物，经Sfcl酶切后可产生27 bp和418 bp两个片段。结论本研究已成功建立针对c.1138G>A杂合错义突变的直接测序法、ARMS法、酶切鉴定法和ARMS/RE法。所建立的4种方法快速、特异，但各有利弊，同时使用可相互弥补，结合STR连锁分析可把误诊风险降到最低程度。在正常情况下，可在24 h内完成对ACH高危胚胎的PGD。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭奕斌	中山大学中山医学院医学遗传学教研室	48	202	8.0	11.0
2	蒋玮莹	中山大学中山医学院医学遗传学教研室	31	226	8.0	14.0
3	李荣	中山大学中山医学院医学遗传学教研室	7	18	3.0	4.0
4	沈晓婷	中山大学附一院生殖医学中心	10	25	3.0	5.0