嗜热蛋白酶PH1704别构中心量子化学计算与突变体动力学

• 作者: 冯雁 詹冬玲 韩葳葳 高楠
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 嗜热蛋白酶 量子化学计算 别构中心 定点突变
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 物理化学(Physical Chemistry)
• 页码范围: 146-153
• 页数: 8页
• 分类号: O641|O623
• 字数: 5517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20130792

摘要

通过量子化学计算,确定嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3的PH1704蛋白酶别构位点的关键残基为Arg113, Tyr120和Asn129.其中, Arg113及Asn129与别构抑制剂结合,参与别构调控. Tyr120残基位于亚基交界面附近,并与亲核残基Cys100之间以氢键相连,可通过影响亚基聚合来影响酶的亲核催化. DJ-1超家族的4种构建蛋白的结构显示,120位点位于亚基交界面处,影响亚基的聚合,进而影响蛋白酶的活力,并间接参与别构调控.分子生物学实验显示,突变体R113T/Y120P/N129D的kcat/km( L·μmol-1·min-1)值是野生型kcat/km值的6倍, h系数由野生型的0.86转变为1.3,负协同效应消失.113和129位点处阴离子别构剂脱离,从而破坏113,120和129位点间的封闭环结构,使AC交界面α7螺旋(124~129,524~529)间聚合度增强；120位点残基由Tyr转变为Pro,与Cys100间氢键断裂,亲核进攻的阻力减小,从而使酶活力提高,别构负调控消失.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹冬玲	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	40	122	6.0	9.0
3	冯雁	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	28	349	9.0	18.0
6	韩葳葳	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	16	26	4.0	4.0
7	高楠	中国科学院长春应用化学研究所	14	27	3.0	4.0