嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立

• 作者: 刘振兴 李嘉彬 李玉谷 柯浩 梁志凌 郝乐 马江耀 马艳平
• 来源期刊: 南方水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 环介导等温扩增技术 嗜水气单胞菌 温和气单胞菌 实时浊度法 检测
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 页码范围: 8-16
• 页数: 9页
• 分类号: S941.4
• 字数: 5974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.002

摘要

利用环介导等温扩增技术（ loop-mediated isothermal amplification，LAMP）分别建立嗜水气单胞菌（ Aeromonas hydrophila，AH）与温和气单胞菌（ A. sobria，AS）的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验，并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示，LAMP实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌，最低检出限分别为46 fg·mL-1和320 fg·mL-1，是普通PCR方法的104倍和102倍；并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌LAMP快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。