小鼠腺病毒PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 冯育芳 卫礼 岳秉飞 巩薇 李晓波 王吉 王淑菁 贺争鸣
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠腺病毒 聚合酶链式反应 长爪沙鼠 小鼠
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 35-41
• 页数: 7页
• 分类号: R-33|Q95-33
• 字数: 4448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2014.01.007

摘要

目的 建立小鼠腺病毒(MAdV) PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MAdV的检测.方法 根据已发表的小鼠腺病毒(MAdV) E1B基因序列,设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用建立的方法对65只长爪沙鼠、12只小鼠进行检测.结果 建立的MAdV PCR检测方法与小鼠微小病毒、多瘤病毒无交叉反应;以MAdVDNA为模板,所能检测DNA最小模板浓度为1.67 pg/μl,可检测病毒最小滴度为10-7/ml; MAdVDNA在-30℃冰箱放置12个月,仍能扩增出大小约606 bp的可见目条带.经PCR检测,65只沙鼠和12只小鼠均为阴性.结论 建立的小鼠腺病毒(MAdV) PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于小鼠、长爪沙鼠等实验动物MAdV的检测.