SELEX技术筛选甲基苯丙胺适配子

• 作者: 孙美琪 张玉荣 曹芳琦 曾立波 胡小龙 陆鑫蔚 黄琴蓉
• 来源期刊: 中国司法鉴定
• 学科: 政治法律
• 关键词: 甲基苯丙胺 适配子 SELEX SPR
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 鉴定科学
• 页码范围: 21-24,58
• 页数: 5页
• 分类号: DF795.1
• 字数: 3585字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2072.2014.01.005

摘要

目的 利用SELEX筛选甲基苯丙胺适配子,并初步鉴定获得甲基苯丙胺的适配子.方法 体外合成全长为76 bp的随机ssDNA文库,以甲基苯丙胺完全抗原偶联到溴化氰活化琼脂糖上,作为固相靶分子对随机ssDNA文库进行SE-LEX筛选.利用SPR测定适配子和甲基苯丙胺的结合率和特异性,通过MFOLD分析软件对适配子进行二级结构预测和结合位点分析.结果 经过10轮筛选后,甲基苯丙胺适配子的结合率由88.3 RU上升到113.7 RU,表明特异性适配子得到逐步富集.获得的适配子进行测序,得10个序列,二级结构均为茎-环结构,可能是适配子和甲基苯丙胺结合的结构基础.结论 本研究使用SELEX技术筛选小分子毒品甲基苯丙胺适配子的方法,获得与甲基苯丙胺特异性结合的适配子序列,揭示了适配子与甲基苯丙胺结合的基本结构,为制备特异性甲基苯丙胺检测试剂盒奠定了基础.