肝脏去唾液酸糖蛋白受体特异性RNA适配子的SELEX筛选与鉴定

• 作者: 余源 冯新华 刘嘉 杨东亮 杨燕 胡斌 郭培宣 陆蒙吉 马智勇 黄红平
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 适配子 SELEX技术 去唾液酸糖蛋白受体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 197-202
• 页数: 6页
• 分类号: Q819
• 字数: 3301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.003

摘要

目的 获得能够特异性高亲和力结合肝脏特异性去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor, ASGPR)的RNA适配子,为开发诊断和治疗肝脏疾病的靶向性试剂和药物奠定基础.方法 合成一个长度为115 nt含有25个随机序列的单链DNA随机文库,通过体外转录构建出单链RNA适配子随机文库,以肝脏ASGPR大亚基为靶蛋白,采用SELEX(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术筛选具有高亲和力的ASGPR特异性RNA适配子;通过膜结合测定实验、凝胶阻滞实验鉴定筛选适配子对靶蛋白的特异性和亲和力.结果 经过12轮筛选获得了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子.结论 成功地筛选出了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子库.