钙蛋白酶通过降解突触蛋白Ⅰ介导脑出血后继发性神经元损伤

• 作者: 张兆辉 张国新 张振涛 熊婧 王洪财 胡丹
• 来源期刊: 中国卒中杂志
• 关键词: 钙蛋白酶 脑出血 突触蛋白Ⅰ
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 993-998
• 页数: 6页
• 字数: 4354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5765.2014.12.003

摘要

目的观察钙蛋白酶在实验性脑出血后继发性神经元损伤中的作用及其机制。<br>　　方法脑内注射自体血液法制作小鼠脑出血模型，将10周龄雄性C57BL/6J小鼠实验动物随机分为4组：0h组（对照组）、2h组、12h组和24h组，每组10只小鼠。收集血肿周围脑组织后检测血肿周围组织钙蛋白酶活性水平，免疫印迹法检测突触蛋白Ⅰ表达水平。重组的突触蛋白Ⅰ与钙蛋白酶共孵育后检测其降解过程，并观察钙蛋白酶抑制剂ALLN和MDL28170的作用。在体外培养的神经元样大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）中加入钙蛋白酶，观察其细胞损伤作用和对突触蛋白Ⅰ的降解。<br>　　结果脑出血后2h血肿周围脑组织钙蛋白酶活性升高，至24h达到高峰。脑出血0h、2h、12h和24h后钙蛋白酶活性读数分别为234.32、343.87、425.29和597.36，12 h组和24 h组与对照组相比差异具有显著性（P＜0.05）。同时突触蛋白Ⅰ水平逐渐降低，提示其降解。至血肿形成后24 h下降到对照组的67.00%（P＜0.01）。纯化的重组突触蛋白Ⅰ与钙蛋白酶共孵育后出现降解，孵育30 min后突触蛋白Ⅰ含量下降至对照组（0 h组）的57.75%（P=0.001），在钙蛋白酶抑制剂ALLN（50μmol/L）和MDL28170（10μmol/L）存在的情况下，突触蛋白Ⅰ水平分别为对照组的87.00%和84.75%（与单纯钙蛋白酶处理组30 min组相比，P＜0.05）。外源性钙蛋白酶与PC12细胞共孵育12 h后细胞活力下降到对照组的58.25%（P＜0.01），而ALLN和MDL28170处理组细胞活力升高到对照组的83.00%和80.25%（与单纯钙蛋白酶处理组相比，P＜0.01）。<br>　　结论钙蛋白酶通过降解突触蛋白Ⅰ参与脑出血后的继发性神经损伤，有可能成为脑出血的治疗靶点。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张国新	华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科	3	10	2.0	3.0
2	王洪财	华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科	6	23	4.0	4.0
3	张振涛	武汉武汉大学人民医院神经内一科	1	5	1.0	1.0
4	熊婧	武汉武汉大学人民医院神经内一科	1	5	1.0	1.0
5	胡丹	武汉武汉大学人民医院神经内一科	1	5	1.0	1.0
6	张兆辉	武汉武汉大学人民医院神经内一科	1	5	1.0	1.0