百草枯诱导PC12细胞MicroRNA的变化及bcl-2调控机制

• 作者: 周志俊 娄丹 常秀丽 黄敏
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 百草枯 PC12细胞 微列阵芯片 原二癌基因蛋白质c-bcl-2
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 字数: 5224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2014.01.003

摘要

目的 探讨百草枯(paraquat,PQ)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)细胞毒性中MicroRNA(miRNA)的表达及bcl-2的调控机制.方法 以PC12细胞为多巴胺能神经元的细胞模型,用终浓度为0、62.5 μmol/L PQ分别诱导PC12细胞24 h,用微列阵芯片技术筛选变化显著的miRNA,实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time PCR)进行验证;根据microRNA数据库(TargetScan 5.1)提供的靶标预测分析结果,搜寻其相关的靶标;用终浓度为0、62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0 μmol/L PQ染毒细胞24 h,Annexin V-FITC/PI法流式细胞仪测定细胞凋亡,RT-PCR测定miR-34a、miR-Let-7e的相对表达水平,免疫印迹法(Western blot)测定bcl-2蛋白表达水平.结果 与对照组比较,125.0、250.0、500.0、1000.0 μmol/L PQ染毒PC12细胞24h后,细胞存活率明显降低,细胞凋亡率明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),且呈现剂量依赖性.基因芯片技术显示,62.5 μmol/L PQ作用于PC12细胞24 h引起8个miRNA表达下调,11个miRNA表达上调;其中miR-34a上调、miR-Let-7e下调最为明显.RT-PCR显示,随着PQ浓度的增加,miR-Let-7e表达水平持续下降,miR-34a表达水平持续上升,与芯片结果一致;随着PQ染毒剂量增加,bcl-2蛋白表达水平明显降低,且与miR-34a的表达量呈剂量-反应关系.结论 miRNAs的异常表达参与了PQ致PC12细胞损伤过程.PQ可能通过上调miR-34a表达增加bcl-2蛋白表达,进而诱导PC12细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周志俊	复旦大学公共卫生学院教育部公共卫生安全重点实验室	173	1202	17.0	24.0
2	常秀丽	复旦大学公共卫生学院教育部公共卫生安全重点实验室	34	203	8.0	12.0
3	黄敏	宁夏医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病教研室	28	53	3.0	6.0
4	娄丹	复旦大学公共卫生学院教育部公共卫生安全重点实验室	4	3	1.0	1.0