口服结核Ag85 A-CD226 DNA疫苗在小鼠脾与肠道的表达水平检测

• 作者: 吕昌龙 孙逊 朱俊丰 李岩 李胜军 杨芳莉 桑力轩 王大南
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: Ag85A CD226 DNA疫苗 脾脏 小肠固有层
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 2983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2014.03.001

摘要

目的：了解结核 Ag85A-CD226 DNA 疫苗经灌胃方式接种小鼠后在脾淋巴细胞与肠道的表达情况。方法将构建的pcDNA3.1-Ag85A-CD226、pcDNA3.1-Ag85A和pcDNA3.1-CD226真核表达质粒转化DH5α感受态大肠杆菌,扩增并提取纯化质粒,用脂质体包裹制成DNA疫苗。经灌胃方式将制备的DNA疫苗接种C57BL/6小鼠,设置Ag85A-CD226疫苗组、Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组。采用间接免疫荧光法检测Ag85A和CD226在肠道的表达。采用流式细胞术检测脾CD4+T细胞、CD8+T细胞和NK细胞的CD226表达。结果 CD226在Ag85A-CD226疫苗组脾脏CD4+T细胞和NK细胞的表达均明显强于Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)；CD226在Ag85A-CD226疫苗组脾脏CD8+T细胞的表达明显强于Ag85A疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),与CD226疫苗组相比虽有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。 CD226在Ag85A-CD226疫苗组小肠派氏淋巴结表达明显强于Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义( P<0.01)。 Ag85A只在Ag85A-CD226疫苗组和CD226疫苗组小肠固有层表达,且在Ag85A-CD226疫苗组的表达明显强于CD226疫苗组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Ag85A-CD226 DNA疫苗接种后,CD226在脾淋巴细胞和肠道表达增强,Ag85A 在肠道表达增强,CD226的表达增加会增强Ag85A在肠道的表达水平。