尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达及纯化

• 作者: 刘志刚 杨小猛 杨平常 袁谢芳 陈涛
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 尘螨 肠道微生物 Hypothetical protein CE2118蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 879-883
• 页数: 5页
• 分类号: R384.4|R562.2
• 字数: 3358字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.09.001

摘要

目的 研究尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达和纯化,为研究其在尘螨疫苗免疫治疗中的作用奠定基础.方法 采用生物信息学方法,根据GenBank中Hypothetical protein CE2118蛋白的基因序列,将其中稀有密码子改造为大肠杆菌常用密码子并进行二级结构优化,合成Hypothetical protein CE2118基因,构建原核表达载体pGEX6P-1-hypothetical protein CE2118并经酶切鉴定,在大肠埃希菌Rosetta (DE3)中用异丙基β D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,重组产物采用GST亲和层析纯化柱纯化.结果 经密码子改造和二级结构优化后Hypothetical protein CE2118基因长度为588bp,其编码蛋白理论分子量为21 kDa.重组表达载体经酶切鉴定与理论推测结果相符,该基因经IPTG诱导在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中得到高效的可溶性表达,纯化后的重组蛋白分子量约为21 kDa,其单一蛋白纯度达95％以上.结论 本研究成功构建了Hypothetical protein CE2118基因的pGEX6P-1原核重组质粒,获得的可溶性重组蛋白为进一步研究肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118在尘螨疫苗免疫治中的作用机理奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
3	杨平常	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	28	67	5.0	6.0
5	陈涛	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	3	2	1.0	1.0
6	杨小猛	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	8	29	3.0	5.0
9	袁谢芳	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	2	3	1.0	1.0