新生隐球菌COP9复合体基因CSN6的敲除与鉴定

• 作者: 周兆婧 孟云芳 廖万清 张超 方伟 杨雅骊 法振宗 赵静宇
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新生隐球菌 COP9信号复合体 CSN6 致病机制
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324,330
• 页数: 5页
• 分类号: R379.5
• 字数: 2852字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建新生隐球菌COP9复合体蛋白元件Csn6的基因同源重组敲除框,并通过基因枪转化系统敲除CSN6基因.方法 应用生物信息学方法获得COP9复合体蛋白元件的基因信息,采用套叠PCR的方法,构建包含报告基因NEO和CSN6基因ORF两侧上下游同源DNA片段的同源重组框.应用基因枪将其转化入新生隐球菌感受态细胞,通过PCR和DNA测序对遗传霉素(G418)耐受的阳性克隆子进行筛选与验证.结果 成功构建了新生隐球菌基因突变株csn6裣.结论 COP9复合体亚基CSN6基因突变株的构建,为今后新生隐球菌COP9复合体的分子致病机制研究奠定基础.