免疫磁珠纯化小鼠精原干细胞的研究

• 作者: 任晓霞 王栋 秦彤 贺亚南 赵学明 路永强 郝海生 陈晓丽
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 免疫磁珠分选 流式细胞分析 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 38-43
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20140706

摘要

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)富集纯化是利用SSCs进行基因修饰新方法等研究的前提基础.采用免疫磁珠分选法,使用干细胞抗体CD90.2进行小鼠SSCs的纯化富集,并采用流式细胞分析法和定量PCR验证了磁珠分选效率.流式细胞分析结果:免疫磁珠分选后SSCs纯度为50.11％.荧光定量PCR检测结果:磁珠分选后支持细胞特异表达基因GATA4显著下调(6倍)、SSCs表达基因GFRα-1上调(6.5倍)、生殖干细胞特异表达基因OCT4极显著上调(5.9倍),3个基因相对表达量的变化说明,免疫磁珠分选效率为6倍.流式细胞分析法所产生的偏差可能是受到了未解离磁珠及SSCs本身转基因荧光的影响.