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摘要:
目的:利用ITS2序列对豆蔻类中药材进行DNA条形码鉴定研究.方法:本文采集了包括豆蔻两个基原白豆蔻Amomum kravanh与爪哇白豆蔻Amomum compactum、红豆蔻Alpinia galanga、草豆蔻Alpinia katsumadai等在内的70份样品,采用试剂盒法提取基因组DNA,应用Primer premier 5.0设计引物,通过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增其ITS2序列,并对PCR产物进行双向测序,所得序列经CodonCode Aligner V3.71拼接后,采用MEGA5.0软件进行序列比对,计算种内和种间距离,构建邻接树(Neighbor-joining tree,NJ Tree).ITS2序列采用基于隐马尔可夫模型(Hidden Markov model,HMM)的注释方法获得.结果:通过新设计引物扩增的序列可以注释到5.8S与28 S,扩增序列位于ITS2间隔区.采用新设计的引物,所有实验样品均可获得ITS2序列,NJ树结果显示不同种豆蔻类药材分别聚为一支,可以互相区分,且可以与其混伪品相互区分.另外,通过序列比对发现有5个SNP(s)存在于豆蔻与其它物种种间,且有2个稳定的SNP(s)存在于白豆蔻和爪哇白豆蔻种间,可用于二者的准确鉴定.结论:ITS2序列作为DNA条形码可准确稳定地鉴别不同种豆蔻类药材,本研究将为保障临床安全用药提供新的技术手段.
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文献信息
篇名 基于DNA条形码鉴定豆蔻类中药材
来源期刊 中国现代中药 学科
关键词 豆蔻 DNA条形码 ITS2 物种鉴定
年,卷(期) 2014,(11) 所属期刊栏目 专论
研究方向 页码范围 888-894
页数 7页 分类号
字数 4712字 语种 中文
DOI 10.13313/j.issn.1673-4890.2014.11.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈晓辰 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 6 106 5.0 6.0
2 王丽丽 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 10 51 5.0 7.0
3 韩建萍 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 17 321 11.0 17.0
4 廖保生 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 4 62 3.0 4.0
5 王晓玥 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 3 15 2.0 3.0
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大16开
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