胃癌相关mir-148a靶向调控胃泌素受体CCKBR

• 作者: 孙秀梅 张澍田 朱圣韬 李鹏 王拥军 王民 邢洁 郭庆东 郭水龙
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃泌素受体 胆囊收缩素B受体 miR-148a 胃癌 microRNA
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2|R332
• 字数: 2555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2014.009.001

摘要

目的：研究胃癌相关miR-148a与胃泌素受体CCKBR的调控关系，并分析其调控结合位点。方法生物信息学预测人CCKBR 3’ UTR上miR-148a 的结合位点；利用 PCR扩增 miR-148a 前体构建真核表达载体；Northern Blot检测miR-148a真核表达载体的表达；构建CCKBR 3’UTR野生型和突变型荧光素酶报告载体，并利用双荧光素酶活性分析检测分析miR-148a对CCKBR基因表达的调控和结合位点；Western Blot检测miR-148a过表达对CCKBR蛋白表达的作用。结果在人CCKBR 3’UTR上找到3个miR-148a的潜在结合位点；miR-148a真核表达载体构建成功，转染胃癌细胞后可显著过表达；miR-148a通过人CCKBR 3’UTR上423bp处的结合位点抑制CCKBR的基因表达；miR-148a过表达显著抑制胃癌细胞中CCKBR的蛋白表达。结论 CCKBR是胃癌相关miR-148a的靶基因，miR-148a通过其3’UTR上的结合位点抑制CCKBR的基因表达和蛋白合成，提示miR-148a可能通过调控CCKBR参与胃癌的发生发展。