可溶性Sox2-11R重组蛋白的制备与鉴定

• 作者: 姜少帅 张运海 张鹏飞 李侠 韩菲
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: Sox2 重组蛋白 可溶性 制备
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 798-804
• 分类号: S813.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13610/j.cnki.1672-352x.20140827.005

摘要

旨在通过原核表达制备可溶性Sox2-11R重组蛋白,并验证其穿膜能力.首先,采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与蛋白转导域11聚精氨酸(11 arginine,11R)的融合表达和与成纤维细胞的共孵育验证11R的穿膜能力.其次,将目的基因Sox2-11R在原核表达载体pET30a中表达,通过优化表达条件获取可溶性Sox2-11R重组蛋白.最后,利用Ni柱纯化重组蛋白,SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定;并用免疫荧光染色验证重组蛋白是否具有进入细胞核的能力.结果表明,成功构建了pET30a-Sox2-11R原核表达载体,纯化的Sox2-11R重组蛋白具有穿膜能力,且在细胞培养基中具有较高溶解度,这为制备其他重编程因子的重组蛋白提供了参考,也为外源蛋白诱导iPSCs奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张运海	安徽农业大学动物科技学院安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室	61	264	9.0	14.0
2	张鹏飞	安徽农业大学动物科技学院安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室	4	16	2.0	4.0
3	李侠	安徽农业大学动物科技学院安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室	2	1	1.0	1.0
4	姜少帅	安徽农业大学动物科技学院安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室	1	1	1.0	1.0
5	韩菲	安徽农业大学动物科技学院安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室	1	1	1.0	1.0