雷帕霉素在卡介苗(BCG)感染小鼠RAW264.7细胞过程中对NO的调控作用

• 作者: 何玉龙 吴月红 张文清 李敏 王玉炯
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 雷帕霉素(rapamycin) 卡介苗(BCG) NO 诱导性一氧化氮合成酶基因(iNOS) 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 941-948
• 页数: 8页
• 字数: 4880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.08.003

摘要

巨噬细胞产生的一氧化氮(nitric oxide,NO)在抵御及杀灭病原微生物过程中起重要作用.为了解哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染宿主巨噬细胞过程中对NO的调控作用,本研究在卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染体外培养的BALB/c小鼠(Mus musculus)巨噬细胞系RAW264.7过程中添加mTOR信号通路的特异性抑制剂雷帕霉素(rapamycin),通过Griess、实时荧光定量PCR、Western blot等方法检测NO及诱导性一氧化氮合成酶基因(inducible nitric oxide synthase,iNOS) mRNA及其蛋白的表达情况,同时以脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理的RAW264.7细胞作为参照.结果表明,与未经处理的空白对照组相比,BCG、LPS刺激6、12和24 h可以极显著增加RAW264.7细胞中NO的产生(P＜0.01),iNOS mRNA及其蛋白水平表达极显著增加(P＜0.01).与未添加rapamycin组相比,BCG感染6和12h时,10 nmol/L rapamycin可以极显著抑制RAW264.7细胞中NO的产生及iNOS的表达(P＜0.01),但24 h时rapamycin对产生NO的抑制作用不显著(P＞0.05),但同样可以极显著抑制iNOS的表达(P＜0.01); LPS刺激6和24 h时,10 nmol/L rapamycin可以极显著抑制RAW264.7细胞中NO的产生(P＜0.01); 12 h时,显著抑制NO的产生(P＜0.05); LPS刺激时,6h时rapamycin对iNOS的表达的抑制作用不显著(P＞0.05),12和24h时极显著抑制iNOS的表达(P＜0.01).结果显示,rapamycin在MTB感染宿主巨噬细胞过程中对NO的产生有重要的调控作用,为揭示mTOR信号通路在结核病发生及发展过程中的作用提供重要的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉炯	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	108	671	13.0	20.0
2	李敏	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	48	200	7.0	12.0
3	何玉龙	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	11	12	2.0	3.0
4	吴月红	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	7	12	2.0	3.0
5	张文清	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	3	8	2.0	2.0