松弛素对TGF-β诱导的内皮细胞间质化的抑制作用

• 作者: 周希 周浩 张怀勤 蔡洁洁 郑高暑 陈潇 陈灵芝 黄伟剑
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 松弛素 内皮细胞间质化 TGF-β 心肌纤维化
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2|R541
• 字数: 4366字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨松弛素(RLX)对TGF-β诱导的内皮细胞间质化现象的影响.方法:采用体外分离的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为体外细胞模型,通过TGF-β 10 ng/mL诱导内皮细胞间质化,100 ng/mL和200 ng/mL RLX分别预处理,再与TGF-β联合培养48 h.光镜下观察细胞形态学改变,CCK-8实验和transwe11实验检测细胞增殖和迁移能力,免疫荧光单双染技术观察vimentin和CD31的表达变化,蛋白免疫印迹技术观察各实验组vimentin、CD31、ve-cadherin和α-SMA的蛋白表达.结果:阴性对照组内皮细胞呈铺路石样生长,TGF-β诱导组细胞形态向梭形转化,呈扩散迁移趋势.与阴性对照组相比,TGF-β诱导组细胞增殖、迁移能力明显增强;而RLX可抑制TGF-β诱导的增殖和迁移.免疫荧光单染结果显示,与阴性对照组相比,TGF-β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin明显上升;与TGF-β组相比,RLX联合TGF-β处理组CD31表达上调而vimentin表达下调.免疫荧光双染结果显示,阴性对照组以内皮性质的细胞为主,仅存在少量的CD31和vimentin双阳性细胞;TGF-β诱导组双阳性细胞明显增多;与TGF-β组相比,RLX联合TGF-β处理组间质效应的双阳性细胞下调,而内皮效应的双阳性细胞增多.蛋白免疫印迹结果显示,与阴性对照组相比,TGF-β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31 (0.36±0.076 vs 0.88±0.086)和ve-cadherin (0.54±0.046 vs 1.09±0.13)表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin (0.72±0.102 vs 0.21±0.081)和α-SMA(o.88±0.084 vs 0.24±0.046)明显上升(P＜0.05);与TGF-β组相比,RLX联合TGF-β处理组CD31 (0.67±0.09、0.59±0.12 vs 0.36±0.076)和ve-cadherin(0.85±0.09、0.72±0.064 vs 0.54±0.046)表达上调,而vimentin (0.56±0.011、0.48±0.06 vs 0.72±0.102)和α-SMA (0.65±0.081、0.54±0.032 vs 0.88±0.084)表达下降(P＜ 0.05),且呈剂量依赖性.结论:RLX可抑制TGF-β诱导的内皮细胞向间质化细胞转化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄伟剑	温州医科大学附属第一医院心内科	53	116	6.0	8.0
2	郑高暑	温州医科大学附属第一医院心内科	3	4	1.0	2.0
3	周希	温州医科大学附属第一医院心内科	3	4	1.0	2.0
4	陈灵芝	温州市中心医院检验科	2	4	1.0	2.0
5	周浩	温州医科大学附属第一医院心内科	11	29	3.0	5.0
6	陈潇	温州医科大学附属第一医院心内科	1	3	1.0	1.0
7	蔡洁洁	温州医科大学附属第一医院心内科	1	3	1.0	1.0