新型重组VPAC2激动剂RD的制备及促进胰岛素功能的分子机制

• 作者: 洪岸 罗天杰 马义
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因重组 VPAC2受体激动剂 糖尿病 胰岛素
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 60-66
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20141109

摘要

利用DNA重组、原核表达、Chitin-Beads柱和HPLC纯化、质谱鉴定等技术,制备了一种新型具有抗2型糖尿病功能的VPAC2受体激动剂RD,并初步研究和揭示了其在Ⅱ型糖尿病治疗中有效促进胰岛素信号传导的分子机制.实验结果表明:利用基因重组技术制备的VPAC2受体激动剂RD的分子量为3 785.0 Da,纯度为96％;将重组肽作用于正常或胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞(IR模型细胞),1和5μmol/L重组肽RD可促进正常3T3-L1脂肪细胞IRS-1蛋白的表达(分别增加36％和42％),而促进IR模型细胞IRS-1蛋白的表达增加更为明显(分别增加55％和63％).IR模型细胞经1,5和10μmol/L重组肽RD处理后,pIRS1(ser307)的表达水平分别比降低了5.9％,10.7％和32.7％.在IR模型细胞中,5和10μmol/L RD处理组,IRS-2蛋白的表达水平分别降低12.8％和40.6％;而1,5和10μmol/L RD各处理组pIRS2蛋白的表达水平分别降低35.1％,40.8％和48.5％.5 and 10μmol/L RD处理的IR模型细胞中Akt蛋白的表达显著增强,表达量分别增加74％和77％.1,5和10μmol/L的重组肽RD处理的IR模型细胞中,Akt Ser473磷酸化水平分别降低33.9％,64.0％和71.1％;Akt Thr308磷酸化水平分别升高13.5％,78.6％和83.3％.建立了重组VPAC2受体激动剂RD的制备技术,并在体外细胞水平检测了其效果(显著促进正常3T3-L1脂肪细胞及IR模型细胞IRS-1蛋白的表达;降低IR模型细胞pIRS1(ser307),IRS-2,pIRS2蛋白的表达;促进IR模型细胞Akt蛋白的表达及Akt Thr308磷酸化水平等),为阐明其在2型糖尿病治疗中的分子作用机制及药用研发提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪岸	暨南大学细胞生物学系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心	107	856	14.0	25.0
2	马义	暨南大学细胞生物学系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心	38	182	8.0	11.0
3	罗天杰	暨南大学细胞生物学系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心	4	0	0.0	0.0