牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中的优化表达

• 作者: 刘菲 张云 张梦 时坤 曾范利 李建明 李晶 杜锐
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒 E2基因 卡介苗 优化表达
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 94-100
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.01.013

摘要

为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)基因工程活载体疫苗,根据已知的BVDV Changchun184毒株E2基因序列,利用DNAStar生物学软件对其进行分析,预测了可能存在的抗原表位,设计6对引物,分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段,1-297 aa、1-345 aa、1 374 aa、45-297 aa、45-345 aa和45-374 aa,克隆至穿梭表达载体pMV361中,经酶切、PCR扩增和测序证实已正确插入到表达载体中,构建了6个原核表达质粒.阳性重组质粒通过电转化到卡介苗(BCG)感受态中,热诱导后,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹检测.结果表明6个重组质粒在卡介苗中均有不同程度的表达,表达产物与理论推测的相对分子质量一致.Western blot结果显示其融合蛋白能被牛抗BVDV的阳性血清识别,具有相应的反应原性.本研究为进一步研究BVDV基因工程活载体疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晶	吉林农业大学动物科学技术学院	9	8	2.0	2.0
2	曾范利	吉林农业大学中药材学院	44	128	6.0	9.0
3	时坤	吉林农业大学中药材学院	63	149	6.0	9.0
4	李建明	吉林农业大学中药材学院	32	205	9.0	13.0
5	刘菲	吉林农业大学动物科学技术学院	16	60	4.0	7.0
6	张云	吉林农业大学动物科学技术学院	10	22	3.0	4.0
7	张梦		1	3	1.0	1.0