不可分型流感嗜血杆菌 LPD 基因分布及其重组表达产物免疫保护作用

• 作者: 丁红辉 严杰 孙爱华 柳锡永 王荣山 金志标 金洪星
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 不可分型流感嗜血杆菌 LPD 基因/ 脂蛋白 D 重组表达 免疫原性 免疫保护性
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 928-932
• 页数: 5页
• 字数: 4232字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2014.12.007

摘要

目的：了解无荚膜型流感嗜血杆菌（NTHi）临床菌株中外膜脂蛋白 D（LPD）基因分布及其序列保守性，确定重组表达的 LPD（rLPD）免疫原性和免疫保护性。方法采用 PCR 检测 NTHi临床菌株中 LPD 基因，T-A 克隆后测序。构建 LPD 基因原核表达系统，采用 Ni-NTA 亲和层析法提纯表达的 rLPD。采用 SDS-PAGE 和 Bio-Rad 凝胶图像分析系统检测 rLPD 表达情况及其产量。采用ELISA 和 Western blot 检测 rLPD 的抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解 rLPD 对 NTHi 致死性感染的免疫保护效果。结果所有 NTHi 菌株均检出 LPD 基因，其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达98.0％~99.4％和98.5％~100％。所构建的原核表达系统能高效表达 rLPD。rLPD 免疫家兔可产生高效价抗体，NTHi 全菌兔抗血清及 NTHi 感染患儿血清能识别 rLPD 并与之结合。ELISA 结果显示，93.6％（58/62）和53.2％（32/62）NTHi 感染患儿血清分别 rLPD-IgM 和 rLPD-IgG 阳性。100μg或200μg rLPD 对 NTHi 致死性感染小鼠的免疫保护率分别为60.0％或73.3％。结论 LPD基因在 NTHi 菌株中广泛分布且序列保守，其重组表达产物 rLPD 具有良好的免疫原性及一定的免疫保护作用，可作为 NTHi 基因工程疫苗候选抗原之一。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华		112	523	11.0	15.0
2	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
3	金洪星		10	50	4.0	7.0
4	王荣山		9	32	4.0	5.0
5	丁红辉		4	5	1.0	2.0
6	柳锡永		2	7	2.0	2.0
7	金志标		1	3	1.0	1.0