不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白的原核表达及其黏膜免疫效应

• 作者: 乔海霞 常月立 张存辉 张彦霞 张玉妥 戴明艳 贾晓辉
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 不可分型流感嗜血杆菌 外膜蛋白P6 原核表达 黏膜免疫效应
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 生物治疗
• 页码范围: 216-221
• 页数: 6页
• 分类号: R378.4
• 字数: 4434字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2014.02.017

摘要

目的:研究不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白的免疫原性,以确定重组P6蛋白在不可分型流感嗜血杆菌疫苗研制中的应用价值.方法:扩增P6目的基因,构建重组质粒PGEX-6P2/P6,鉴定后将其转化入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导、纯化后经SDS-PAGE、Western blot分析;纯化的重组蛋白经滴鼻方式免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测血清IgG,肺灌洗液IgA的水平及脾细胞中IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ的产生水平.CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖情况.结果:成功构建了重组表达载体PGEX-6P2/P6,并表达GST-P6融合蛋白.Western blot证明GST-P6蛋白能与菌源P6蛋白免疫小鼠后的抗血清发生特异性反应.动物实验表明重组P6蛋白通过滴鼻途径既能刺激小鼠产生血清IgG,又能诱导肺黏膜产生较高的特异性IgA抗体.重组蛋白+ IL-2组小鼠脾淋巴细胞所产生的IL-17和IFN-γ的含量高于对照组(P＜0.05).结论:P6蛋白的原核表达载体PGEX-6P2/P6在大肠杆菌XL1-Blue中大量表达,重组P6蛋白经黏膜免疫可以同时诱导产生体液免疫和细胞免疫.此实验为P6蛋白疫苗的研发提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔海霞	河北北方学院医学检验学院	42	144	5.0	9.0
2	张玉妥	河北北方学院医学检验学院	40	110	5.0	9.0
3	常月立	河北北方学院医学检验学院	10	10	2.0	2.0
4	张存辉	河北北方学院医学检验学院	11	30	3.0	5.0
5	张彦霞	河北北方学院医学检验学院	26	51	4.0	5.0
6	戴明艳	河北北方学院医学检验学院	8	27	3.0	5.0
7	贾晓辉	河北北方学院医学检验学院	3	15	2.0	3.0