免疫共沉淀联合质谱法筛选和鉴定TS-CBP86-IV相互作用蛋白

• 作者: 刘宁 刘德铭 唐石伏 张迅 朱春晖 李群生 杨文涛 梁季鸿 申树林 陆庆华
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 睾丸特异性钙结合蛋白 免疫沉淀法 质谱分析法 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-9,14
• 页数: 4页
• 分类号: R446.121.3
• 字数: 2620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2014.10.002

摘要

目的：利用免疫共沉淀联合质谱分析方法，分别从人精子总蛋白和重组BL21细胞总蛋白中筛选和鉴定与TS-CBP86-IV相互作用的蛋白质。方法用克隆技术得到TS-CBP86-IV cDNA编码基因，构建原核表达载体，导入大肠杆菌BL21中诱导表达纯化重组蛋白；另外收集人精子细胞，提取总蛋白，用特异抗体通过免疫共沉淀法分离出TS-CBP86-IV蛋白复合体，再用质谱鉴定可能与其相互作用的蛋白质。结果利用免疫共沉淀联合质谱分析筛选到16个与TS-CBP86相互作用的候选蛋白质，数据库检索发现部分蛋白具有相同功能注释，参与精子运动调控。结论免疫共沉淀联合质谱分析方法成功筛选和鉴定出TS-CBP86-IV相互作用蛋白质，为进一步研究TS-CBP86-IV的功能奠定了良好的基础。