RNA干扰抑制c-jun基因表达对放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R放射敏感性的影响

• 作者: 曲颂 朱小东 李龄 梁世雄 苏芳 葛莲英 郭亚 郭思言
• 来源期刊: 中华放射医学与防护杂志
• 关键词: 鼻咽癌 放射抗拒 c-jun基因 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 放射生物学
• 页码范围: 895-899
• 页数: 5页
• 字数: 4205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2014.12.004

摘要

目的 利用RNA干扰技术抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,研究其对CNE-2R细胞放射敏感性的影响及其潜在机制.方法 设计合成3组特异性针对c-jun基因的siRNA,构建慢病毒vshRNA载体,感染CNE-2R细胞,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组对目的基因的抑制效果;并通过克隆形成实验测定其放射敏感性,CCK-8实验检测细胞的存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 重组慢病毒c-jun-RNAi-LV2能明显下调CNE-2R细胞中c-jun的mRNA和蛋白水平的表达(F =217.20、42.07,P＜0.05).6MVX射线联合c-jun-RNAi-LV2组在0、2、4、6和8 Gy照射后细胞的吸光度值均显著低于未转染组和阴性对照组(F=42.70 ～ 200.67,P＜0.05).克隆形成实验显示,c-jun-RNAi-LV2组与未转染组及阴性对照组相比,SF2、D0和Dq值均减小,放射增敏比(SERD0)为1.41.细胞凋亡实验结果显示,未经照射的c-jun-RNAi-LV2组与联合2 Gy照射的凋亡率分别为(20.93±1.99)％和(38.17±0.83)％,均高于未转染组和阴性对照组的凋亡率[0 Gy:(10.97±0.70)％和(20.43±0.25)％;2 Gy:(10.80±1.25)％和(19.53±1.50)％;F=50.54、330.14,P＜0.05].结论 RNA干扰技术可有效抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,使细胞放射敏感性增高,其作用可能与c-jun基因的下调使细胞增殖能力减弱,细胞凋亡增多有关.