人白介素－6受体小分子拮抗剂高通量筛选模型的建立

• 作者: 何阳阳 孙志伟 庞晓斌 张畅 杜冠华 杜鹏 王双 阎雨
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,白细胞介素6 拮抗剂 酶联免疫吸附测定 筛选模型
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 921-926
• 页数: 6页
• 分类号: R593
• 字数: 5549字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.12.001

摘要

目的：建立新的白介素－6受体（ interleukin－6 receptor， IL－6R）小分子拮抗剂高通量筛选模型。方法PCR扩增IL－6R胞外区基因，将其克隆至真核表达载体构建重组质粒pABHis－IL6R，瞬时转染HEK293T细胞进行分泌表达。利用Western 印迹实验、受体配体结合实验对表达产物进行活性验证。利用二者的相互作用以及Fc片段与酶标二抗结合的特性建立基于ELISA法的IL－6R拮抗剂筛选模型，并用Z′－因子检测与已知拮抗剂ab47215对该模型的稳定性与可靠性进行评估。结果成功构建了真核表达载体pABHis－IL6R，并对IL－6R进行了分泌表达。所表达的IL－6R能够被特异性抗体识别，能够与其配体rhIL－6特异性地结合，并表现出良好的量效关系。经测算得出，该模型的Z′－因子为0．53，满足高通量筛选的要求。 ab47215能够剂量依赖性地阻断IL－6R与其配体的结合，其IC50＝（0．55±0．11）μg／ml。结论建立了一种新颖而简便的IL－6R拮抗剂筛选模型，为寻找高效、低毒的小分子拮抗剂奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜冠华	中国医学科学院药物研究所	258	3046	28.0	44.0
2	王双	军事医学科学院生物工程研究所	31	134	5.0	11.0
3	孙志伟	军事医学科学院生物工程研究所	68	390	10.0	16.0
4	庞晓斌	河南大学药学院	39	129	7.0	9.0
5	何阳阳	中国医学科学院药物研究所	2	14	2.0	2.0
6	阎雨	中国医学科学院药物研究所	2	14	2.0	2.0
7	张畅	军事医学科学院生物工程研究所	3	20	2.0	3.0
8	杜鹏	军事医学科学院生物工程研究所	5	7	2.0	2.0