产胸苷磷酸化酶菌株初筛方法的建立及其应用

• 作者: 李红梅 王伟洁 陈宝珍 陈群毅
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 短乳杆菌 初筛方法 紫外诱变 胸苷磷酸化酶
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 78-83
• 分类号: Q55|Q525
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20141211

摘要

建立了一种快速简便地筛选高产胸苷磷酸化酶菌株的初筛方法及其在紫外诱变育种中的应用.结果显示,在液体培养基中,添加25mmol/L胸苷不会影响菌体生长且菌体中的胸苷磷酸化酶能催化胸苷生成胸腺嘧啶,在同等浓度下产物胸腺嘧啶OD290nm远大于胸苷OD290nm,从而导致发酵液OD290nm显著升高,据此建立产胸苷磷酸化酶短乳杆菌的初筛方法.在此基础上结合紫外诱变条件的优化,确定初次紫外照射时间为20 s,停止5 min后再照射10 s、15 s、20 s,控制紫外致死率在80％左右,以此条件构建突变文库.通过初筛和复筛确定突变株EB27、EA42酶活分别达到1.025 U/mg湿菌体和0.916 U/mg湿菌体,较初始菌株提高了50％和35％,且具有良好的遗传稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红梅	上海理工大学医疗器械与食品学院	37	126	6.0	8.0
2	王伟洁	上海理工大学医疗器械与食品学院	6	11	1.0	3.0
3	陈宝珍	上海理工大学医疗器械与食品学院	4	3	1.0	1.0
4	陈群毅		1	1	1.0	1.0