人胰岛素生长因子1的原核表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 杨桂 汪付兵 胡汉宁 陈薇 黎安玲
• 来源期刊: 公共卫生与预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: hIGF-Ⅰ 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-10
• 分类号: R587.1
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达、纯化人胰岛素样生长因子1 (hIGF-Ⅰ),并制备其单克隆抗体(mAb).方法 通过RT-PCR方法从人体肝脏组织中扩增得到hIGF-Ⅰ基因片段,构建重组原核表达质粒pET-28a(+)/hIGF-Ⅰ,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.将表达蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对hIGF-Ⅰ的特异性单克隆抗体.结果 成功表达出了hIGF-Ⅰ蛋白.SDS-PAGE电泳显示所表达蛋白质的相对分子量(Mr)大小约为18 KD.获得了1株能够稳定表达抗hIGF-Ⅰ抗体的杂交瘤细胞株(8F2),其分泌的mAb的IgG亚类(型)为IgG2b,ELISA检测,对应腹水mAb的效价分别为1:7.5× 105.Western-blot结果显示抗hIGF-Ⅰ mAb具有良好的特异性.结论 成功制备了抗hIGF-Ⅰ mAb,为进一步研究IGF-Ⅰ在肿瘤治疗中的作用提供了有力的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡汉宁	武汉大学中南医院检验科	52	354	10.0	16.0
2	陈薇	武汉大学中南医院检验科	41	258	10.0	13.0
3	汪付兵	武汉大学中南医院检验科	26	90	5.0	8.0
4	杨桂	武汉大学中南医院检验科	32	130	6.0	9.0
5	黎安玲	武汉大学中南医院检验科	21	69	6.0	7.0