Bcl-x mRNA前体剪接转换寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡的实验研究

• 作者: 付红 李妍哲 李朝晖 田宇 田男 韩亮
• 来源期刊: 中国肿瘤临床
• 关键词: 选择性剪接 寡核苷酸 凋亡 流式细胞术 胶质瘤细胞
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 359-362
• 页数: 4页
• 字数: 3447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.20132178

摘要

目的:探讨Bcl-x mRNA前体剪接转换寡核苷酸(Bcl-x splice-switching oligonucleotides,Bcl-x SSO)对胶质瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响.方法:设计靶向Bcl-x基因下游选择性5 '端剪接位点的Bcl-x SSO,β-globin SSO作为阴性对照SSO.SSO经2'-甲氧乙基(2'-O-methoxyethyl,MOE)、全硫代磷酸化(phosphorothioate,PS)修饰.采用阳离子脂质体将不同的SSO转染至U251细胞.采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测Bcl-x SSO对U251细胞的增殖抑制率.流式细胞术定量检测U251细胞的凋亡率.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Bcl-x SSO对Bcl-xL、Bcl-xS mRNA表达水平的影响,Western blot方法检测Bcl-x SSO对Bcl-xL、Bcl-xS蛋白表达的影响.结果:MTT结果显示Bcl-x SSO显著抑制U251细胞的增殖,且抑制作用呈剂量依赖性.流式细胞术检测Bcl-x SSO能够明显促进U251细胞凋亡.RT-PCR检测Bcl-x SSO处理组Bcl-xL mRNA表达水平下降,Bcl-xS mRNA表达水平升高.Western blot检测Bcl-x SSO处理组Bcl-xL蛋白表达水平下降,Bcl-xS蛋白表达水平升高.结论:在胶质瘤细胞U251中,Bcl-x SSO可特异性的作用于Bcl-x mRNA前体,调节其选择性剪接模式从Bcl-xL转换至Bcl-xS,进而促进U251细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田宇	吉林大学白求恩医学部中日联谊医院神经外二科	132	469	11.0	14.0
2	付红	吉林大学白求恩医学部中日联谊医院神经外二科	15	51	3.0	7.0
3	田男	浙江中医药大学生命科学学院	25	33	3.0	4.0
4	李朝晖	吉林大学白求恩医学部中日联谊医院神经外二科	66	276	10.0	13.0
5	韩亮	吉林大学白求恩医学部中日联谊医院神经外二科	23	58	4.0	6.0
6	李妍哲	吉林大学白求恩医学部中日联谊医院神经外二科	7	5	2.0	2.0