硫代磷酸化修饰的反义 TGF-β1寡核苷酸抑制血管损伤后内膜增殖

• 作者: 吴可贵 李庚山 林志鸿 蔺佩鸿 谢良地
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β1 反义寡核苷酸 血管损伤 平滑肌细胞
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1433-1438
• 页数: 6页
• 分类号: R543.5
• 字数: 4548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.08.017

摘要

目的：探讨反义转化生长因子β1（TGF-β1）寡核苷酸对血管损伤后血管平滑肌细胞（VSMCs）表型转变的影响及对内膜增殖的作用。方法：在跨过TGF-β1 cDNA序列的起始密码区ATG范围内，设计含15个碱基、无修饰或硫代磷酸化修饰的反义TGF-β1寡核苷酸（ AS TGF-β1）及对照的正义（与反义寡核苷酸互补）寡核苷酸（ S TGF-β1）。球囊导管损伤SD大鼠颈总动脉，术后7 d取出正常或损伤的血管进行VSMCs的培养， RT-PCR及蛋白印迹分别检测VSMCs生物学标志平滑肌22α蛋白（ SM22α）、基质Gla蛋白和骨桥蛋白，以及TGF-β1和纤维连结蛋白（fibronectin，FN）mRNA和蛋白质的表达。采用ALZET 泵皮下注射硫代磷酸化修饰AS TGF-β1及S TGF-β1（90μg· kg-1· d-1），连续给药28 d后测定血管内膜与中膜的面积比（I/M）。结果：（1）AS TGF-β1对血管损伤后VSMCs TGF-β1 mRNA表达并无明显作用，但呈浓度依赖性抑制TGF-β1蛋白质的表达，而S TGF-β1不影响TGF-β1mRNA和蛋白质的表达。（2）AS TGF-β1呈浓度依赖性抑制血管损伤后VSMCs DNA的合成，而不管是AS TGF-β1还是S TGF-β1对正常VSMCs DNA的合成均无明显的量效作用；同时AS TGF-β1显著抑制了血管损伤后VSMCs FN的合成。（3）AS TGF-β1显著促进了VSMCs SM22αmRNA的表达，但抑制了基质Gla蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达，这种相反的作用在0.01及0.1μmol/L的水平最为明显。（4）硫代磷酸化修饰的AS TGF-β1治疗28 d后，显著抑制了颈动脉损伤后新生内膜的增殖，I/M比对照组下降了68％。结论：AS TGF-β1特异性抑制了VSMCs TGF-β1蛋白的表达，抑制血管损伤后VSMCs增殖及合成、分泌FN，减轻血管损伤后新生内膜的增殖。上述作用可能与逆转血管损伤后VSMCs的表型转变有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴可贵	福建医科大学附属第一医院干部病房	26	178	8.0	12.0
3	李庚山	武汉大学人民医院心内科	198	1812	22.0	33.0
4	谢良地	福建医科大学附属第一医院干部病房	131	585	13.0	18.0
6	蔺佩鸿	福建医科大学附属第一医院急诊科	52	195	7.0	11.0
9	林志鸿	福建医科大学附属第一医院急诊科	30	164	7.0	11.0