肝素诱导血小板减少症抗体的酶联免疫吸附检测方法研究

• 作者: 丁少华 李勇 段生宝 王红梅 田晶晶 蒙青林 陈强 陈晔洲
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板4因子 肝素 肝素诱导血小板减少症 酶联免疫吸附法
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 65-68
• 页数: 4页
• 分类号: R446.61
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2014.06.021

摘要

目的：研究建立肝素诱导的血小板减少症抗体（HIT）的酶联免疫吸附检测方法。方法人血小板4因子（PF4）与肝素形成的复合物作为包被抗原，加入待检血浆孵育洗涤后，加入酶标二抗，孵育洗涤后加入底物显色，终止反应后测定吸光度A450nm／A630nm ，根据阴阳性标准品判定检测结果，并与 IBL方法进行比较分析，对该方法进行优化和性能评估。结果用制备的人PF4建立检测方法，通过正交试验得到待检样品和酶标抗体的最佳稀释度分别为1∶100和1∶1500，对三份阳性标准血浆重复测定，该方法的批内和批间平均变异系数分别为7.67％和7.76％（P均＜10％）。对100人份无肝素使用史的健康人血浆测定，该方法的阴阳性参考值分别为0.304和0.456。与 IBL检测方法同时检测100份血液透析病人样品，检测结果经统计学分析，该方法的灵敏度、特异度和准确度分别为90％，97.78％和97％，阴阳性预测值分别为81.8％和98.88％，K＝0.84（K 值在0.81～1），Pexac＝0.012＜0.05，差异有统计学意义，一致性为优，95％可信区间为92.59％～99.17％。结论建立的 H IT抗体的酶联免疫吸附检测方法与 IBL检测方法相比性能相当、一致性程度良好，可以满足临床对 H IT患者的检测和诊断需求。