表达小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重组非复制型痘苗病毒的构建及鉴定

• 作者: 任皎 庞聪 王平兴 田厚文 谭文杰 赵莉 阮力 阳静
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 痘苗病毒 非复制
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 479-483
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 3350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.04.006

摘要

目的：以非复制型痘苗病毒天坛株为载体表达小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF），并体外鉴定其生物学活性。方法：构建含有小鼠GM-CSF的重组痘苗病毒质粒，与非复制型痘苗病毒进行同源重组，筛选表达小鼠GM-CSF的重组痘苗病毒rNTVGMCSFLacZ，对目的基因及蛋白的表达进行鉴定，并在体外检测目的蛋白的生物学活性。结果：构建的重组病毒rNTVGMCSFLacZ中正确插入了小鼠GM-CSF基因，Western印迹结果表明其能正确表达GM-CSF，且在体外证明rNTVGMCSFLacZ表达的小鼠GM-CSF能分泌到细胞外，具有生物学活性。结论：构建了一株能分泌表达有生物学活性的小鼠GM-CSF的重组非复制型痘苗病毒。