耐除草剂转基因大豆质粒标准分子的构建

• 作者: 于艳波 仇有文 张明辉 王傲雪 甄贞 高学军
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 转基因大豆 质粒标准分子 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 转基因研究
• 页码范围: 49-54
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2014.03.07

摘要

以A2704-12、A5547-127、MON89788和GTS-40-3-2等4种商品化耐除草剂转基因大豆为材料,构建质粒标准分子用于解决转基因作物检测时标准物质缺乏现状.采用双酶切技术,将扩增的大豆内参基因和耐除草剂转基因大豆转化体特异性片段克隆至pMD18-T载体上.结果显示,质粒标准分子定性PCR特异性序列片段的LOD均为20 copies/μL,定量检测体系Bias最大值≤9.89％,CV最大值≤5.96％,SD最大值≤0.06,实验得到的所有偏差值均在允许范围之内,构建的质粒标准分子适用于4种耐除草剂转基因大豆特异性检测.