IPO8基因启动子区rs35100176位点变异对基因表达的影响

• 作者: 周小鸥 李卫东 江和 熊建军 王庭 许晓源
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Importin 8 基因多态性 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1640-1644
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.09.016

摘要

目的：研究人importin 8（ IPO8）基因启动子区rs35100176多态性位点CCT插入/缺失对基因表达的影响。方法：PCR扩增IPO8基因启动子区包含rs35100176多态位点的342 bp序列，通过测序获得了49例DNA样本的基因多态性分布。以CCT/CCT插入纯合子或-/-缺失纯合子DNA样本为模板，扩增含有不同插入/缺失序列的IPO8基因启动子片段，插入萤光素酶报告质粒pGL3-Basic，构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。重组质粒经Fugene 6．0转染入细胞，采用双萤光素酶报告系统，检测携带不同多态性序列的重组质粒中报告基因的表达活性；real-time PCR 检测各不同基因型细胞中 IPO8 mRNA 表达。结果：通过测序发现rs35100176多态位点存在 CCT/CCT、CCT/-和-/-3种表型，其基因分布频率分别为18.37％、55.10％和26.53％。成功构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。双萤光素酶报告基因活性检测结果显示，pGL3-3N Insertion启动下游报告基因表达的相对活性与pGL3-3N Deletion 相比显著减弱，两者存在显著差异（P＜0.05）；real-time PCR结果显示，CCT纯合插入的HEK293细胞中IPO8 mRNA的表达显著低于CCT纯合缺失的Saos-2细胞。结论：IPO8基因启动子区rs35100176位点的CCT碱基插入变异能显著抑制启动子活性，从而影响IPO8基因的转录。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊建军	九江学院基础医学院	21	28	4.0	4.0
5	许晓源	九江学院基础医学院	17	87	5.0	9.0
9	周小鸥	九江学院基础医学院	14	28	3.0	4.0
13	王庭	九江学院基础医学院	14	25	3.0	4.0
17	江和	九江学院基础医学院	8	42	3.0	6.0